面对众多萤光素酶(荧光素酶)检测试剂盒无从下手?别担心,掌握核心逻辑,选择一目了然。作为报告基因检测领域的资深供应商,普洛麦格(Promega)一直专注于技术创新,致力于为客户提供精良的研发工具。其萤光素酶技术基于酶促反应产生自发光,无需激发光,因此背景更低、灵敏度更高,且能避免待测化合物自发荧光的干扰。

首要抉择:单报告基因还是双报告基因?

这是选择的关键起点,取决于你的实验设计。

选择双报告基因的三种情况:当实验需要进行瞬时转染;或需要研究信号减弱(如负调控);又或者必须引入内参报告基因来校正转染效率和细胞状态差异,以提升数据精度时,双报告基因系统是更优方案。经典搭配是以萤火虫(Firefly)萤光素酶作为主报告基因,以海肾(Renilla)萤光素酶作为内参。普洛麦格为此提供了成熟的Dual-Luciferase®Reporter(DLR)系统(非均质法)和Dual-Glo®系统(均质法)。

何时使用单报告基因?如果你的实验不涉及上述情况,例如已构建稳定转染的细胞系,则进行单报告基因检测即可。

认识核心工具:三种萤光素酶如何选?

明确单/双报告后,需根据性能选择报告基因类型。普洛麦格主要提供三种:

NanoLuc®萤光素酶:这是经过基因工程改造的小分子酶(19.1kDa),使用专利底物Furimazine,能产生高强度、稳定的辉光型信号,灵敏度极高。其发光强度可比Firefly或Renilla萤光素酶高100倍。

萤火虫(Firefly)萤光素酶:最经典常用的报告基因,表达效率高,稳定性好,主要作为主报告基因使用。

海肾(Renilla)萤光素酶:经典报告基因,在双报告基因检测中主要用作内参对照。

精准匹配:根据组合锁定终极方案

将前两步结合,就能找到对应产品:

若选择Firefly+Renilla双报告组合:可选用普洛麦格的Dual-Luciferase®Reporter Assay System(DLR)或Dual-Glo®Luciferase Assay System。

若选择NanoLuc®+Firefly双报告组合(二者可互换作为主报告基因或内参):应选择Nano-Glo®Dual-Luciferase®Reporter(NanoDLR)Assay System。该系统操作简便,采用“加样-检测”模式,信号稳定,适合高通量。

若仅进行NanoLuc®单报告基因检测:则直接选择Nano-Glo®Luciferase Assay。

总结秘籍:先根据实验设计定“单双”,再依据灵敏度等需求选“酶类”,最后根据组合对号入座。普洛麦格提供了从载体、检测试剂到发光检测仪的完整解决方案,助你轻松告别选择困难!